羊人工授精是人为的利用器械SRGC取公羊的SRGC,经过品质检查和一系列
处理,再通过器械将SRGC输入SRGC母羊生殖道内,达到母羊受胎的配种方式。人工授精可以提高种公羊的利用率,既加速了羊群的改良进程,防止疾病的传播,又节约饲养大量种公羊的费用。人工授精技术包括器械的消毒、SRGC精、SRGC品质检查、SRGC的稀释、保存和运输、母羊SRGC鉴定和输精等主要技术环节。1消毒技术1.1器械的消毒SRGC精、输精及与SRGC接触的所有器械都要消毒,并保持清洁、干燥,存放在清洁的柜内或烘干箱中备用。SRGCSRGC要用2%的碳酸氢钠溶液清洗,再用清水冲洗数次,然后用75%的酒精消毒,使用前用
生理盐水冲洗。集精瓶、输精器、玻璃棒和存放稀释液及生理盐水的玻璃器皿洗净后要经过30分钟的蒸气消毒,使用前用生理盐水冲洗数次。金属制品如开膣器、镊子、盘子等,用2%的碳酸氢钠溶液清洗,再用清水冲洗数次,擦干后用75%的酒精或进行酒精灯火焰消毒。1.2场地的消毒准备一间向阳、干净的配种无菌室,要求地面平整,光线充足,面积为10~12平方米,室温为18℃~25℃。也
可选择宽敞、平坦、清洁、安静的室外场所。日常消毒用1%新洁尔灭或1%高锰酸钾溶液进行喷洒消毒,每日于SRGC精前和SRGC精后各进行1次。每星期对SRGC精室进行1次熏蒸消毒,所用药品是40%的甲醛溶液500毫升,高锰酸钾250克。1.3羊体的消毒公羊实施配种前和情期母羊实施配种前,用1%新洁尔灭溶液对羊体进行反复消毒。1.4消毒应
注意的问题严格遵守消毒时间和消毒药品的配量要求;熏蒸消毒时,应关闭门窗,第2天应提前1小时到岗,敞开门窗;注意安全,防止物品损坏,每次消毒完毕,应及时关掉电源。2SRGC精技术2.1SRGC精前的准备2.1.1器械的准备:所有的器械都要提前清洗、干燥、消毒,存放于消毒柜内备用。2.1.2公羊的准备:种公羊
第一次SRGC精时的年龄应在1.5岁左右,
不宜过肥,也不宜
过瘦,初次参加SRGC精的公羊,应先进行SRGC精训练,方法是让其"观摩"其他公羊配种;或用SRGC母羊的尿液或分泌物涂抹在公羊鼻尖上,SRGCSRGC。SRGC精SRGC训练成功后,
才能进行正式操作。2.1.3SRGCSRGC的安装:安装SRGCSRGC时,先将内胎装入SRGCSRGC外壳,再装上集精瓶,注意内胎平整,不要出现皱褶。为保证SRGCSRGC有一定的润滑度,用清洁玻璃棒蘸少许灭菌凡士林,均匀涂抹在SRGCSRGC内胎和前三分之一处。为使SRGCSRGC温度接近母羊温度,从SRGCSRGC注水孔注入少量温水,使水约占内外胎空间的70%,SRGCSRGC温度在SRGC精时应保持在40℃~42℃。注水后,再通过气体活塞吹入气体,使SRGCSRGC保持一定弹性,吹入气体的量一般以内胎表面呈三角形合拢而不向外鼓出为适宜。2.2SRGC精SRGC精前用温水洗种公羊SRGC的包皮,并擦干净。将台羊保定后,引公羊到台羊处,SRGC精时SRGC精员站立在公羊的右侧,当种公羊爬跨时,迅速上前,右手持SRGCSRGC靠在母羊臀部,其角度与母羊的SRGC的位置相一致(与地面成35~45度角),用左手轻托SRGC包皮,迅速将SRGC导入SRGCSRGC中。羊的SRGC速度很快,当发现公羊有向前冲的动作时即已SRGC,要迅速把装有集精瓶的一端向下倾斜,并竖起集精瓶,送SRGC到处理室,放气后取下集精瓶,盖好盖,并记录公羊号,放于操作台上进行SRGC品质检查。2.3SRGC精频率成年种公羊每日SRGC精1~2次,连SRGC3天休息1次,初SRGC羊可酌减。2.4SRGC精注意事项严格遵守消毒技术要求,所有SRGC精物品未经消毒不得应用。SRGC精训练是一项细致的工作,必须由SRGC精熟练人员负责进行。所用SRGC精器的环境条件必须严格把握,温度要控制在40℃~42℃。3SRGC品质检查SRGC品质检查的目的是为了评定SRGC品质的优劣,以便决定它能不能用于输精配种,同时,也为确定SRGC的稀释倍数提供科学依据。3.1外观检查3.1.1颜色:正常的SRGC为浓厚的乳白色,肉眼可看到乳白色云雾状。3.1.2气味:正常SRGC无味或略带腥味。3.1.3SRGC量:公羊一次SRGC精的SRGC量一般为0.5~2.0毫升,山羊平均为0.8~1.0毫升,绵羊平均为1.0~1.2毫升。经外观检查,凡带有SRGC臭味,出现红色、褐色、绿色的SRGC判为劣质SRGC,应弃掉不用,一般情况下不再做显微镜检查。3.2显微镜检查3.2.1SRGC活率:SRGC的活率是指在38℃的室温下直线前进的SRGC占总SRGC数的百分率。检查时以灭菌玻璃棒蘸取1滴SRGC,放在载玻片上加盖玻片,在400~600倍显微镜下观察。全部SRGC都做直线运动评为1级,90%的SRGC做直线前进运动为0.9级,以下以此类推。3.2.2SRGC的密度:是指每毫升SRGC中所含的SRGC数。取1滴新鲜SRGC在显微镜下观察,根据视野内SRGC多少分为密、中、稀SRGC。"密"是指在视野中SRGC的数量多,SRGC之间的距离小于1个SRGC的长度;"中"是指SRGC之间的距离大约等于1个SRGC的长度;"稀"为SRGC之间的距离大于1个SRGC的长度。为了精确计算SRGC的密度,可用血球计数器在显微镜下进行测定和计算,每毫升SRGC中含SRGC25亿以上者为密,20亿~25亿个为中,20亿以下为稀。3.3SRGC质量的评定标准SRGC为乳白色,无味或略带腥味,SRGC活力在0.6以上,密度在中等以上(每毫升SRGC的SRGC数在20亿以上),畸性SRGC率不超过20%,该羊SRGC判为优质SRGC。以上几项质量标准任何一项达不到要求,均被定为劣质SRGC。3.4SRGC检查时应注意的问题做显微镜检查时,温检箱内温度控制在38℃左右。SRGC品质检查要求迅速准确,室内要清洁,室温保持在18℃~25℃。SRGC的形态检查,一般1周内对同1头公羊SRGC做1次染色检查,其他时间可根据经验做直观估测。4SRGC的稀释、分装、运输和保存4.1SRGC的稀释SRGC稀释的目的是扩大SRGC量,增加每次SRGC精的可配母羊数,提高种公羊的利用率,还可供给SRGC营养,增强SRGC活力,有利于SRGC的保存、运输和输精。4.1.1稀释液的配制:稀释液的配方选择易于抑制SRGC活动,减少能量消耗,延长SRGC寿命的弱酸性稀释液。配方一:生理盐水稀释液:是用注射用生理盐水或经过过滤消毒的0.9%氯化钠溶液作稀释液。此种稀释液简单易行,稀释后的SRGC应在短时间内使用,是目前生产实践中最为常用的稀释液。但用这种稀释液稀释时,稀释的倍数不宜太高,一般以2倍以下为宜。配方二:奶汁稀释液:奶汁先用7层纱布过滤后,再煮沸消毒10~15分钟,降至室温,去掉表面脂肪即可。这种稀释液稀释效果好,但稀释倍数不能太高,以3倍以下为宜。配方三:葡萄糖卵黄稀释液:在100毫升蒸馏水中加葡萄糖3克、柠檬酸钠1.4克,溶解后过滤3~4次,蒸煮30分钟后灭菌,降至室温,再加新鲜卵黄(不要混入蛋白)20毫升,再加青霉素10万单位振荡溶解。这种稀释液有增加营养的作用,可作7倍以下的稀释。4.1.2SRGC的稀释倍数:要根据SRGC密度、活力而定稀释比例,稀释后的SRGC,每毫升有效SRGC数不少于7亿个。4.1.3SRGC稀释的操作步骤:根据镜检得出SRGC密度确定稀释倍数,根据稀释倍数计算出应加入的稀释液的量,用量杯量取应加的稀释液量。稀释前将两种液体置于同一温水中,然后将稀释液沿着SRGC瓶缓缓倒入,为使混合均匀可稍加摇动或反复倒动1~2次,稀释完毕后,立即进行活力镜检,并将镜检结果填人SRGC精登记表。4.1.4SRGC稀释应注意的事项:稀释液温度与SRGC温度保持一致,在20℃~25℃室温和无菌条件下操作,SRGC稀释的倍数应根据SRGC密度而定,一般为1~3倍,稀释后的每毫升有效SRGC数不能低于7亿个。4.2SRGC的分装将稀释好的SRGC根据各输精点的需要量分别装于2~5毫升小试管中,SRGC面距试管口不少于0.5~1.0毫升,然后用玻璃纸和胶圈将试管口扎好,在室温下自然降温。分装后贴上标签,标签上注明SRGCSRGC出的日期、时间、活力、密度、公羊的品种。4.3SRGC的运输在近距离运送SRGC时,不必进行降温,将装有SRGC的集精瓶或小试管口封严,用棉花包好放入保温瓶中即可。远距离运输时,可用直接降温法降温。运输SRGC时要防止剧烈震动,降温或升温都要缓慢进行,每次输送的SRGC都要注明公羊号、SRGC精时间、SRGC量和SRGC品质。4.4SRGC的保存4.4.1常温保存:SRGC稀释后,保存在20℃以下的室温环境中。在这种条件下,SRGC运动明显减弱,可在一定限度内延长SRGC存活时间。常温保存只能保存1天。4.4.2低温保存:在常温保存的基础上,温度进一步缓慢降至0℃~5℃之间。可用直接降温法,将SRGC装入小试管内,外面包以棉花,再装入塑料袋内,直接放入装有冰块的广口保温瓶或保温箱中,使温度逐渐降至2℃~4℃。低温下保存的有效时间为2~3天。4.4.3冷冻保存:SRGC的冷冻保存要求的技术、环境和设备条件较严格,操作过程也比较复杂,这里不加详述。5SRGC鉴定适时配种是提高羊人工授精受胎率的关键措施之一,母羊SRGC的主要表现:食欲减退、兴奋不安、嘶鸣、爬跨其他羊或接受其他羊爬跨而静立不动;阴门红肿,频频排尿而流出透明的黏液;用试情公羊与母羊接触(隔着试情架),母羊表现温驯,并将后躯转向公羊,阴门肿胀;用SRGC开膣器插入SRGC,使之开张,SRGC盛期的母羊SRGC潮红、润滑,SRGC颈口开张,分泌的黏液呈豆花样。6输精6.1输精前的准备6.1.1人员的准备:输精人员应穿工作服,用肥皂水洗手擦干,用75%酒精消毒后,再用生理盐水冲洗。6.1.2输精器械的准备:把洗涤好的开膣器、输精枪、镊子用纱布包好,一起用高压锅蒸汽消毒。6.1.3母羊的准备:对SRGC母羊进行鉴定及健康检查后,才能输精,母羊输精前,应对外SRGC进行清洗,以1/3000新洁尔灭溶液或酒精棉球进行擦拭消毒,待干燥后再用生理盐水棉球擦拭。6.1.4SRGC的准备:将SRGC置于35℃的温水中升温5~10分钟后,轻轻摇匀,做显微镜检查,达不到输精要求的不能用于配种。6.2输精方法将用生理盐水湿润后的开膣器插入SRGC深部触及SRGC颈后,稍向后拉,以使SRGC颈处于正常位置之后轻轻转动开膣器90度,打开开膣器,开张度在不影响观察SRGC的情况下开张的愈小愈好(2厘米),否则易引起母羊努责,不仅不易找到SRGC颈,而且不利于深部输精。输精枪应慢慢插入到SRGC颈内0.5~1.0厘米处,插入到位后应缩小开膣器开张度,并向外拉出1/3,然后将SRGC缓缓注入。输精完毕后,让羊保持原姿势片刻,放开母羊,原地站立5~10分钟,再将羊赶走。6.3输精次数和输精量输精次数:母羊1个情期应输精2次,发现SRGC时输精1次,间隔8~10个小时应进行第2次输精。输精量:每头份的输精量,原SRGC为0.05~0.10毫升,稀释后SRGC应为0.1~0.2毫升。6.4输精时应注意的问题输精人员要严格遵守操作规程,输精员输精时应切记做到深部、慢插、轻注、稍停。对个别SRGC狭窄的青年母羊,开膣器无法充分打开,很难找到SRGC颈口,可SRGC用SRGC内输精,但输精量需增加1倍。输精后立即做好母羊配种记录。每输完一只羊要对输精器、开膣器及时清洗消毒后才能重复使用,有条件的建议用一次性器具。
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