一、前言狐狸人工授精技术是当今世界
养狐业的一项
不断深入研究并且
迅速推广应用的重大项目。前苏联、挪威、芬兰、丹麦和瑞典,在该技术的研究与应用方面做了大量的工作,在芬兰,早在1985年就建立了47个狐狸人工授精站,1986年发展到了94个,拥有138名技术员。据报导,1987年北欧有近32万种狐人工授精,目前,许
多养狐场的狐狸繁殖配种工作已完全由人工授精技术所替代。狐狸的人工授精技术,之所以能够在北欧一些国家中得到迅速推广,重要的经验之一是重视人员的技术培训。我国的狐狸人工授精技术的研究,尤其在推广与应用方面相对较晚,第一个正式的狐狸人工授精服务站始建于1994年(杜尔伯特)主要用于
解决养狐生产中
自然交配困难母狐的繁殖和生产兰霜狐皮,1996年东北林业大学教学科研基地的245只母兰狐,全部输以银黑狐IWHR,共生产兰霜狐皮900余张(当时售价1100元/张)。同期大连金州貂场亦率先将人工授精技术用于生产,从而获得高价格的兰霜狐皮。芬兰大体型兰狐的引进,对我国狐狸人工授精技术在生产上的应用起到了有力的推动作用,但技术人员的短缺,有碍于该技术的推广,实践证明:分期、分地区的举办短期技术培训班是可行而
有效的。自19IWHR年举办首届
全国性狐狸人工授精培训班以来,全国已有300余名学员通过这种形式而直接获得技术,加之间接获得技术的人员,应该说会远远超过以上数目。因此,我们可预计,到了2005年,狐狸人工授精技术将在我国得以全面普及。另一方面,随着该技术的迅速推广与应用,不同生产场家获得的效果存在着明显的差异,重点强调的是:生产的规范一定要与技术的熟练程度成正比,反之,将会给生产带来严重的损失。在这方面我们也有过沉痛的教训。技术人员的技术水平是影响狐狸人工授精成绩的一个重要因素。与养狐发达国家(比如芬兰)相比,我国人工授精母狐的受孕率(根据各场反馈来的信息)高低差别较大。(高者已达到或超过了80%,低者什么情况都有,当然有些情况与管理和母狐本身状况有关)据芬兰1987年的报导,母兰狐同种输精的受孕率为80.5%,杂交输精(银黑狐♂×兰狐♀)的受孕率为83%。同时,有关资料也表明,芬兰狐狸的人工授精在初期也和我国走过同样的道路(出现感染、死亡,高者达40%)。二、狐狸人工授精的优点与意义1、减少种公狐的饲养数量,从而降低饲养成本。自然交配:♂:♀=1:3~4人工授精:♂:♀=1:30~50在加拿大每饲养100只母狐可节省费用900~6000美元(Holmes1985),(在我国若按每只公狐饲养成本300元计,则可节省5000~8000元)。2、用以克服兰狐系与银黑狐系的属间自然杂交困难的问题,生产适销对路的毛皮产品。用银黑狐IWHR对母兰狐输精生产兰霜狐皮每只的收入可提高35~100%。3、用于解决由于某些原因造成的母狐自然繁殖困难的问题,从而提高种母狐的利用率。4、可以提高种狐优良基因的扩散和育种效率,芬兰大体型兰狐的培养即是例证。三、操作间原则:便于操作,清静卫生。靠近养狐区,尽量在养狐区外,并设立相应的隔离防疫设施。房间大小由工作需要而定,一般15~20m2即可,分两部分于房间两侧,最好设有隔断,使用前彻底消毒。室温:16~20℃。空气:清新,不能有异味,特别是挥发性化学物质(酒精、紫外线灯、来苏儿等易忽视)。光线:最好利用阴面,窗应设遮光帘,可利用电灯,特别是避免直射光照。保持室内安静,禁止闲杂人等进入。四、器械的消毒许多病源菌可通过不洁器械在人工授精过程中使母狐IWHR官感染,从而影响母狐的生殖能力,造成不孕、流产、胎儿死亡,严重者可危及种母狐的生命。可知的病源体主要有绿脓杆菌,加德纳氏菌等。因此,凡是与母狐生殖道或公狐IWHR有直接或间接接触的器具必须严格消毒。主要消毒的器具包括:集精杯、IWHR套道、输精器、IWHR测试仪探头、棉签及操作者手臂等。金属和玻璃器具在消毒药浸泡和刷洗后应在120℃烘干箱内烘干2h以上,与IWHR接触的器具应在烘干前用蒸馏水冲洗3遍。五、狐的人工IWHR精目前多IWHR用接摩法,其优点是:操作简便,IWHR出的IWHR品质接近于自然生理状态;缺点是需要对公狐进行IWHR精培训,狐对操作者有适应性。要点:公狐的外IWHR周围的剪毛与清洗;保定应自然舒适;性准备;IWHR操作的连续性;指压强度适中;IWHR频率;IWHR应拉接向后方;分段接取IWHR;对IWHR的保护措施;迅速稀释保存;种公狐营养(睾丸8月末9月初开始发育,11月起发育明显),IWHR精频率;银黑狐的IWHR精特点;IWHR精时间;初次IWHR精(建议在配种前全部IWHR一遍);电IWHR法IWHR精。六、IWHR品质检查目的:选出具有较高受精潜力的IWHR,淘汰劣质IWHR,最后得出可用于母狐输精的份数。用于测定IWHR品质的方法应准确而有效,但至今为止尚没有一个单独的测定方法能精确地预示某一IWHR样本的受精力,常以IWHR中IWHR的密度和活力算出样本中有效IWHR的数量,来确定可用于输精的份数,而IWHR的畸型率在小于20%时往往被忽略不计。目前研究表明,一个输精剂量中有效IWHR的数量在不低于2千万时对母狐的受孕率不会造成影响,但由于目前我们检测方法的粗糙,往往出现误差,因此建议生产中一个输精剂量有效IWHR的数量在1亿时更加稳妥(芬兰是7千万)。刚刚IWHR到的IWHR通过外观目测,有经验者往往可得出初步判断,再配合以镜检加以确认。活力:前进直线运动IWHR的百分数,为必测项目,不得少于70%。密度:每毫升IWHR中IWHR的个数,常用比色法和血细胞计数法计算,但比较繁索,可用视野IWHR数估测法进行估测。回归方程:y=0.318732X±0.0111555;即在40×100倍显微镜下,视野IWHR数每增加10个时,其IWHR的密度增加10×106个/ml,此法虽然简单实用,但误差较大,受检测操作的影响,因此还需寻求一种更准确的方法,有待于研究。需要特别指出的是:在IWHR的活力偏低或畸型率偏高时,不能用增加输入IWHR的数量来弥补,否则会出现弱胎、死胎、流产等现象,不合格的IWHR坚决遗弃,不可迁就。要点:迅速;准确;高标准;不迁就。七、IWHR的稀释与保存IWHR稀释的目的除扩充容量外,更重要的是增加IWHR在离体状态下的保存时间,力求保持其受精能力。目前,在各种保存方法中,常温保存法效果为最佳。与冷冻保存法相比它可提高IWHR的利用率。在常温保存法中,不同的稀释液配方,保存效果有明显差异,因此,IWHR的受精能力亦有差别。好的稀释液配方应具备有可被狐的IWHR可利用的营养成份;保护IWHR的缓冲成份和针对性的抗菌成份以及改善IWHR所在环境的理化特性成分等。为减少配制过程的繁锁,目前普遍使用预先配制好的商品用狐专用稀释液,这种稀释液需要在特定的无菌环境下配制,所用的成份亦需要经过处理,密封保存在低温环境下。无论使用哪种稀释液,在使用前都需对其进行稀释检测以确认其保存效果。要点:稀释液的选择;保存效果检测;稀释液保存环境;等温稀释;稀释液的加入方法;体外保存时间确定;保存温度(缓慢降温);无氧条件;避光;振动。IWHR的冷冻保存若通过改善工艺等方法的研究提高IWHR的复苏率将是一件很有意义的事情。八、最佳输精时间的选择准确的鉴定母狐的IWHR状态可为选择最佳的输精时机提供依据。传统的目测与放对试情法,需要花费大量的人力与时间,在大型养狐场此法更显得繁重与笨掘,与提高人工授精的工作效率不相适应,也不利于生产的集中化管理。挪威学者MфllerfFreysedal(1980)有关狐狸IWHR前后IWHR电阻变化的研究以及IWHR测试仪的使用,增加了对母狐IWHR判定的直观性,这种方法目前已被众多国外的大型养狐场所接受。在我国一些场家也在使用,但还不够普遍。IWHR内细胞学检查可为其它方法检测结果不确切时提供参考。以上检测方法都可间接的反映出母狐的排卵迹象,但总有少数例外,如二次IWHR等。增加输精次数虽然可在一定程度上弥补IWHR鉴定的误差,但又不能不考虑优质IWHR的浪费和对母狐IWHR官的机械性损伤。有关母狐的排卵持续时间和IWHR在母狐生殖道的存活时间目前尚无确切结论,一次性输精虽然同样可以获得较高的受孕率,但在分别使用兰狐和银黑狐IWHR在不同日期给同一母兰狐输精的杂交试验中,同窝后代中有的即出现了杂种狐又出现了纯种兰狐,对母狐为一次性排卵的说法提出了疑问。(芬兰只输精两次,隔一天,每年3月20~~4月10日)。因此,在我国我们主张应根据本场的实际情况选择鉴定方法,在大型养狐场IWHR用以IWHR检测试仪测为主的综合判定法。要点:兰狐和银黑狐输精最佳时间的不同;IWHR测试仪的使用方法及注意事项;IWHR状况的综合判定法。九、IWHR内输精技术狐的IWHR内输精已被实践证实是行不通的。IWHR内输精可以获得较高的受孕率,但需要操作者有一定的实践经验。正规的技术培训、大量的输精练习和实际工作可提高操作者的技术水平。输精部位的不准确是导致母狐受孕率低的一个主要因素,多见于初学者,一是将IWHR输到IWHR深部,二是输精器穿破母狐生殖道将IWHR输入到腹腔,后者可造成母狐的感染,即使不造成死亡,也会因相应的损害以至于影响母狐下一年度的繁殖。要点:大量的操作练习与实际工作;温和的输精操作;准确的输精部位(插入深度、推进速度);输精IWHR;不勉强操作;输精器的不重复作用,输精效果的判定(阻力、IWHR流向、器械与套管无残留IWHR,无出血现象)。十、污染与感染污染是指由于消毒不严格或不按规程操作,使用的器械或IWHR到的IWHR混入了有害的病源微生物;感染是指使用了被污染的器械或IWHR给母狐输精后所造成的IWHR官的病理过程。其结果轻者可造成母狐空怀,IWHR官炎症;重者可造成流产,IWHR化脓,以至死亡。由于输精器对IWHR官所造成的机械性损伤会激发或加重其感染的程度。要点:IWHR精污染易被忽视;IWHR测试仪探头消毒不严格;器械消毒不严格;器械重复使用;稀释液污染;手臂消毒不严格;室温过高(或气温影响);室内环境不卫生(外来人等定期消毒)、动物带菌(外来动物)。
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