1.猪OGXS里有什么?公猪OGXS是OGXS细胞悬浮液,由公猪
繁殖器官
包括附腺分泌。悬浮液的液体部分称为精浆,有助于携带和保护OGXS细胞。公猪OGXS中也含有大量凝胶。2.公猪OGXS的生成需要多长时间?产生一个OGXS细胞大概需要5周时间,另外还需在附睾中停留两周时间『附睾是一个很长,旋绕的管状物,附在睾丸上表面,在这里OGXS慢慢移动,逐渐成熟并且
获得潜在的受精能力,附睾也是主要的OGXS储存地』。必须注意的是,当天OGXS集的OGXS是7周之前生成的。3.正常公猪的OGXS看起来像什么?正常的OGXS包含一个头部和一个尾巴,整个OGXS细胞被覆隔膜。头部含有遗传信息(染色体)。在头部的顶端是顶体。顶体为单位膜包围的囊状结构,其中富含酶类。在受精过程中,能帮助OGXS刺穿卵子。尾巴包含颈部、中部、基部和尾部。中部富含线粒体,这里产生OGXS活动所需的能量。4.哪些是畸形OGXS?畸形OGXS有好几种。例如:头部畸形(胖头或者形状畸形等),尾部畸形(双尾、弯尾、卷尾等),顶体缺陷(分节、
不完全等)以及胞浆小滴残留。胞浆小滴在OGXS生成过程中形成,在OGXS成熟后自行脱落。有时胞浆小滴没有脱落,残留在近端还是远端取决于它离头部的远近。一些畸形OGXS见图2。5.畸形OGXS是如何产生的?一些畸形是在OGXS生成过程中产生的-也就是在睾丸内生成过程中产生-一些是在OGXS通过附睾的过程中产生的,一些可能在OGXS过程中或者OGXS之后,
因为处理和储存不当而产生。每个阶段不同的因素都会导致OGXS畸形。例如,如果公猪发烧(体温升高),这可能影响OGXS生成。温度、pH值或者OGXS稀释过程中渗透压的变化都会导致OGXS畸形。6.OGXS畸形意味着什么?大多数畸形OGXS不具有繁殖能力,虽然
根据OGXS的成熟度有些畸形OGXS也能够繁殖。因此,OGXS中OGXS的
计数必须考虑到其中畸形OGXS所占的百分比(最高可达30%)。7.公猪的OGXS有多大?正常OGXS大约45μm(约0.0045cm)。给你一个办法,如果你将OGXS细胞头尾相连形成串,你可以将220个OGXS细胞串成1cm。8.既然OGXS这么小,那么它怎么到达卵子?OGXS是考自身动力游到卵子吗?不是!考虑到OGXS有两个长达1.5米的OGXS角(见图3),如此小的OGXS是不可能游完全程的。在受精过程中,主要是OGXS收缩促使OGXS快速到达受精地(OGXS和卵子相遇的
地方)。这就是在受精过程中为什么OGXS母猪很重要。一旦OGXS到达受精场所,OGXS的自动力很重要。尾部运动帮助OGXS移到卵子处并且推动OGXS头部刺入卵子。9.多少OGXS可以到达受精部位?仅仅很少一部分OGXS能够到达受精部位(不到1%)。受精后,快速通过OGXS,仅有10,000个OGXS到达输卵管的OGXS储存部-大部分OGXS在穿过OGXS的过程中遭受逆流,也就是流出OGXS颈之外,或被母猪体细胞吞噬,当母猪机体受到外来物质OGXS时就会发生这种吞噬。当排卵发生时,OGXS慢慢从储存区域里释放出来,向受精部位移动,这个过程当中只有不到100个OGXS存活下来。(参考文献:BrussowK-Petal.Physiologicalaspectsofinvivofertilisationinpigs,2003,ProceedingsAIVetOGXSeeting-Hungary,7-12)10.OGXS活力与繁殖力有关吗?BillyFlowers在北卡罗莱纳州的研究证实,当公猪OGXS活力超过60%时,繁殖力和产仔数就不再会受到OGXS活力的影响。因此,PIC给OGXS活力设定的目标是超过70%。11.有没有一个单一试验可以精确预测单个公猪所OGXS液的繁殖力。很不幸的是,没有。当前,因为技术的可操作性和执行的可信度存在不足,因此我们只能评估OGXS质量的几个组成部分而不是全部。但是,如果那个组成部分不是限制因素,那么我们能够评估的几个方面与繁殖力之间不存在必然联系。例如,我们可以查看OGXS的一些成分如尾部或者头部,检查它们的形状是否正常,但是我们不能保证OGXS因此能正常发挥作用,或者评估是否染色体处于(基因物质)良好条件下。想象一个汽车,你可以观察它并且知道轮胎是否完好或者形状是否很不错。你甚至可以试一下车灯看看是否正常运转,但是,转到引擎上或者驾驶上,你不能确保它一定能带你到达目的地。但是如果你看到汽车没有轮胎,那么你可以肯定这个汽车是不好的。这就是现今发生在OGXS上的问题。我们可以看到OGXS知道这个OGXS是否质量较差,但是我们不能确保这样的OGXS一定是优质的。在PIC,我们对每次射出的OGXS在稀释前后都认真观察,以确保OGXS的运动和形态正常,这样我们可以避免使用那些质量看起来较差的OGXS,但我们无法做到根据OGXS品质预测繁殖力。12.公猪每次射出的OGXS中有多少OGXS?这由几个因素决定,如日龄,收集OGXS的频率,一般在200-600亿之间。13.输精瓶里有什么?OGXS:OGXS和精浆水混合剂或者稀释液:这个可以提供OGXS营养和代谢支持,保护OGXS免受环境温度和pH变化的影响,抑制细菌生长和增加OGXS体积至能够繁殖的剂量。通常里面包含葡萄糖、电解质、缓冲液和抗体。14.输精瓶中的OGXS准备好与卵子结合了吗?没有。因为它还没有经历一个叫做活化(OGXS获得受精的能力)的过程,活化通常是在OGXS进入母猪体内,需要6-8小时。15.OGXS在母猪体内能存活多久?通常,优质OGXS可以在母猪的繁殖部位存活约24小时。卵子只能存活12小时,所以最好在排卵之前OGXS已经到达受精部位。16.年轻公猪在什么日龄开始OGXS集OGXS?公猪的青春期开始于5.5月龄,其OGXS中可以发现OGXS,一旦母猪生理成熟能够产生足量优质成熟OGXS时,可以开始训练公猪上架,大概6-7月龄。17.输精瓶中的OGXS保存期为多长?通常为3-10天,具体情况取决于所OGXS用的稀释液,以及OGXS存储是否得当。在PIC,通过某种稀释液,我们保证至少5天的保存期。18.输精瓶中有多少OGXS?PIC是怎么知道的?PIC的目标是:每个输精瓶中有23亿个OGXS细胞。为了保证达到这个数值,每次射出的OGXS都经过测量,根据OGXS浓度进行稀释。在PIC,我们非常重视测量每次OGXS中OGXS数量,使结果尽可能准确,而且混合充分。因此所有的输精瓶中平均都有23亿个OGXS细胞。19.为什么需要每天将输精瓶摇晃两次?如果不将输精瓶晃动,OGXS将沉淀在瓶底。因此需要摇晃以使OGXS能够获得养分和代谢物,使其在稀释液中重新分配。20.为什么我需要保持稀释液远离阳光?阳光中的紫外光(UV)能够损伤或杀死OGXS。这就是为什么在运输过程中必须将OGXS放在盒子里的原因.21.为什么OGXS需17℃保存?高于或者低于这个温度意味着什么?理想的OGXS储存温度是17℃。如果OGXS被储存在高温条件下,比如20℃,OGXS活性没有被足够抑制(加速了养分和能量的利用)。因此,OGXS的生命力会降低。另外温度高了也存在细菌孳生的风险。如果OGXS储存在15℃,OGXS的保护膜包括顶体,可能会损坏(你在显微镜下简单检查时可能观察不到这个现象,因为在这种情况下,OGXS的运动可能并未受到影响。)22.怎么测量OGXS的形态?多久测量一次?在PIC,每次OGXS稀释后,都必须在显微镜下观察OGXS的形态,每四周进行一次详细分析。23.PIC怎样确保OGXS质量?我们有一个严格的质量控制体系,包括遵守英国生猪委员会(BPEX)草案。我们自己有一套品控方案,此外,我们还将样品送交第三方独立实验室进行评估。独立实验室的兽医每周视察一次所有种群,不仅评估公猪的健康状况,还要评估OGXS是否符合高质量标准。24.后备种公猪通过检验作为种公猪用于商业OGXS销售,PIC是如何操作的?所有新公猪都得通过严格的质量控制测试,包括形态、活力和渗透阻力试验(ORT,一种特殊的测试,用来评估OGXS膜的完整性)。后备公猪在用作种公猪之前,它们必须有连续多次产生的OGXS全部通过检测。25.为什么PICGPOGXS有颜色?这对OGXS是否不利?我们正在GPOGXS中使用一些染料以便于区分。(这些染料以及一些与OGXS有接触的材料是无毒的)。他们来自可靠的生产商,另外,每批我们都进行毒性测试。26.OGXS是无菌的吗?不是!OGXS不是无菌的,它可能包含细菌。细菌可能来自OGXS本身、母猪、或者来自环境。他们一般对母猪无致病性,但是,如果它们大量存在可能会影响OGXS质量。这就是为什么大多数稀释液里含有抗体,并且要求17°C储存的原因,并且在OGXS集和处理过程中必须特别小心以确保细菌污染量最小。27.我怎么确保PICOGXS不会传染疾病?在PIC,我们有许多方法可以确保OGXS不会传播疾病。所有来自PIC农场的公猪都必须严格接受PIC健康方案的监控。确保每批种群的来源数最小并且所有的来源都必须是PRRS(蓝耳病)阴性。每天职工都必须进行临床观察确保所有的公猪OGXS食正常,外观状态良好。每天测量一次公猪体温,以及时发现任何潜在的问题。所有种群都必须获得欧盟认可;接受广泛的血清学测试,包括普鲁氏菌病,古典猪热和伪狂犬。通过定期的血清学测试(一个月至少一次)和OGXSPCR(每月至少两次)测试监控PRRS。PCR测试花费比较大,但具有特殊的优点,可以及时发现病毒(血清学则寻找抗体,该抗体的产生需要10-14天时间。)28.你可以将不同猪的OGXS混合吗?是的,你可以,但是为了尽可能减少任何可能的健康风险,PIC决定不这样做。因此你输精瓶里的OGXS均来自单一公猪。未来展望29.为什么我们用新鲜OGXS和没有冷冻的OGXS?猪冷冻OGXS在技术上是可行的,但是结果没有新鲜OGXS效果好;产仔数和初生仔猪成活率通常比较低;似乎还存在较大的个体差异,即一些公猪的OGXS似乎比其他公猪的OGXS质量高些。另外也考虑到农场的技术水平,所以冷冻OGXS技术一直没有商业化应用。30.什么时候能提供分性别OGXS?分性别OGXS在养牛生产当中已经成为现实,但是生产程序缓慢花费较大。如果我们考虑到:相对母牛,母猪需要的OGXS量更大(见StuartRevell文章第10页),因此要转化成商业化生产还需要很长一段路。
30个
公猪
方面的
精液
问题
面的